Algorytm obowi?zuj?cy po udost?pnieniu zaktualizowanej wersji Ustawowych Rejestrów Transplantacyjnych.

1)  Wykonanie specjalistycznych badań kwalifikacyjnych zgodnie z art. 16c. ustawy z dnia 1 lipca 2005 r. o pobieraniu, przechowywaniu i przeszczepianiu komórek, tkanek i narz?dów (niezb?dne do aktywacji potencjalnego biorcy):

?   Typowania tkankowego - badania antygenów zgodno?ci tkankowej w zakresie minimum HLA- A, B, DRB1. Badania nale?y wykona? w ci?gu 14 dni od daty pobrania materia?u.
?   Poziomu przeciwcia? - badanie PRA-CDC (minimum 1 raz). Badania w surowicy nale?y wykona? maksymalnie 45 dni od pobrania materia?u.

?  Powy?sze dotyczy nowych zg?oszeń.
? W przysz?o?ci przewiduje si? aktywacj? po wykonaniu kompletu badań z dwóch pobrań w ró?nym czasie: typowania tkankowego HLA- A, B, C, DRB1 (DRB3*/DRB4*/DRB5*), DQA1/B1, DPA1/B1 oraz poziomu przeciwcia? PRA-CDC + anty-HLA Luminex screen.
? Ostateczny zakres badań oraz terminy raportowania wyników s? okre?lone w umowie na wykonanie specjalistycznych badań kwalifikacyjnych HLA i PRA.

2)  Badanie kwalifikacyjne typowania tkankowego – badania antygenów zgodno?ci tkankowej (HLA)
Potencjalny biorca i dawca przed przeszczepieniem – wykonanie badań w zakresie antygenów HLA- A, B, C, DRB1 (DRB3*/DRB4*/DRB5*), DQA1/B1, DPA1/B1.
Potencjalni biorcy – minimalnie na niskim poziomie rozdzielczo?ci ze wskazaniem odpowiednika serologicznego, optymalnie na wysokim poziomie rozdzielczo?ci.
Zmarli dawcy – typowanie metod? Real-Time PCR umo?liwiaj?ce wskazanie najcz?stszych alleli.

? Powy?sze do zastosowania po wdro?eniu typowania zmar?ego dawcy metod? Real-Time PCR w o?rodkach przeszczepiaj?cych oraz po zawarciu umowy pomi?dzy PZT i Poltransplantem na finansowanie typowania potencjalnego biorcy w rozszerzonym zakresie.
? U potencjalnych biorców zakwalifikowanych do kolejnego przeszczepienia zaleca si? wykona? weryfikacyjne oznaczenie antygenów zgodno?ci tkankowej (HLA).

3)  Badanie kwalifikacyjne poziomu przeciwcia? (w tym monitorowanie przed przeszczepieniem) – badania PRA i anty-HLA
PRA-CDC (Panel Reactive Antibodies-Complement Dependent Citotoxicity) - badania stopnia uczulenia potencjalnego biorcy ze zró?nicowanym panelem limfocytów od minimum 30 niespokrewnionych osób metod? mikrolimfocytoksyczno?ci zale?nej od dope?niacza: 4 razy w roku (co kwarta?). U potencjalnych biorców zimmunizowanych (PRA-CDC ≥ 50% w poprzednim badaniu) nale?y równolegle wykona? test PRA-CDC z DTT celem weryfikacji obecno?ci przeciwcia? IgM.

? Przewiduje si? uzgodnienie wspólnego protoko?u badania z DTT i cystein? dla wszystkich pracowni zgodno?ci tkankowej

Anty-HLA (Luminex screen), wykrywanie – oznaczanie obecno?ci przeciwcia? anty-HLA- 4 razy w roku (co kwarta?). Poza ocen? jako?ciow? (formu?a baseline), nale?y poda? warto?? maksymalnego MFI na podstawie parametru ?normalized /baseline” dla ka?dej klasy anty-HLA oraz anty-MIC. Obowi?zek wykonania i wpisania wyników oznaczenia specyficzno?ci przeciwcia? (SAB) przy pozytywnym screeningu.

? Wyniki max MFI wprowadzane zgodnie z raportem LabScreen Australia MFI – detail.

Anty-HLA (Luminex SAB), identyfikacja – oznaczanie specyficzno?ci przeciwcia? anty-HLA - 4 razy w roku (co kwarta?). W surowicach wybranych do badań specyficzno?ci przeciwcia? anty-HLA nale?y wykluczy? efekt prozonalny – preanalityka z EDTA. Ocena badań powinna by? prowadzona wed?ug formu?y baseline, minimalne obowi?zkowe raportowane warto?ci powy?ej 500 MFI. Fakultatywnie raportowane w zakresie warto?ci 1-499 MFI.

? Przewiduje si? opracowanie wspólnego protoko?u EDTA jednakowego dla wszystkich pracowni zgodno?ci tkankowej.

Anty-HLA (Luminex anty-C1q), ocena - oznaczanie lityczno?ci przeciwcia? anty-HLA - 2 razy w roku (co drugi kwarta? / co pó? roku). Badanie nale?y prowadzi? w tych samych surowicach, gdzie uzyskano dodatni wynik oznaczenia specyficzno?ci przeciwcia? anty-HLA, wobec tych samych regu? dla raportowania wyniku (baseline /min 500 MFI).

? Obecnie przyj?ty próg 500 MFI dla badań oznaczania lityczno?ci przeciwcia? anty-HLA (anty-C1q) b?dzie dostosowany w zale?no?ci od uzyskanych w populacji rezultatów.
? Dla uzyskanych warto?ci Luminex anty-C1q nale?y poda? warto?? wirtualnego PRA (vPRA). Na podstawie wyniku vPRA nast?pi wyodr?bnienie potencjalnych biorców z najmniejsz? szans? na przeszczepienie (vPRA > 85%) i rozszerzenie diagnostyki.

Zastrze?enie dotycz?ce cz?stotliwo?ci badań poziomu przeciwcia? anty-HLA: W przypadku chorych po leczeniu immunomoduluj?cym oraz chorych wysoko immunizowanych zg?oszonych do przeszczepienia krzy?owego/?ańcuchowego dopuszcza si? mo?liwo?ci wykonywania badań anty-HLA z wi?ksz? cz?stotliwo?ci?, zgodnie z zaleceniami o?rodka transplantacyjnego. W przysz?o?ci przewiduje si? u wszystkich chorych, ze statusem aktywny na KLO oczekuj?cych na przeszczepienie, wykonywanie badań anty-HLA po odnotowanych zdarzeniach immunizacyjnych lecz nie rzadziej ni? co pó? roku.

4)  Wykluczenie autoprzeciwcia? klasy IgG/ IgM

U biorców wysokozimmunizowanych, nale?y wykona? badanie auto CM-CDC – prób? krzy?ow? metod? serologiczn? (complement dependent cytotoxicity cross-match) bez i z odczynnikiem DTT. Nale?y poinformowa? stacj? dializ o konieczno?ci wykonania badań i pobrania odpowiedniego materia?u (surowica + krew biorcy pobrana na heparyn?)

? Planowane w kolejnych etapach wdro?enia programu, po ustaleniu kryteriów MFI dla Luminex anty-C1q.
? Opcjonalna weryfikacja obecno?ci przeciwcia? przeciwko zdenaturowanym epitopom (anty-dHLA) -> korekta vPRA i anty-HLA.

5)  Próba krzy?owa przed przeszczepieniem

Próba krzy?owa z pul? limfocytów T i B (CM-CDC_T+B) oraz próba krzy?owa z pul? limfocytów B (CM-CDC_B).

Dla potencjalnych biorców z potwierdzonymi przeciwcia?ami klasy IgM nale?y wykona? prób? krzy?ow? z odczynnikiem DTT (CM-CDC+DTT).

? Zalecenia dla pacjentów wysokiego ryzyka immunologicznego tj. CM-CDC_T+B (ujemny) i CM-CDC_B (dodatni) oraz ostatni wynik DSA KLASY II > 2000 MFI: Przed transplantacj? nale?y wykona? prób? krzy?ow? metod? cytometrii przep?ywowej (FCXM - flow cytometry cross-match) oraz dodatkowe badanie CM-CDC z nowego pobrania (maksymalnie 24 godziny przed przeszczepieniem).

data publikacji 14.04.2021 r.